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定義：采用聚合酶鏈反應(yīng)等手段在體外獲得成套抗體可變區(qū)輕重鏈基因，將這些基因重組入一定的載體，轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞或噬菌體中，這些抗體基因克隆的集合體。從該文庫中能夠表達(dá)和篩選出所需的單克隆抗體。

學(xué)科：生物化學(xué)與分子生物學(xué)_方法與技術(shù)

相關(guān)名詞：基因工程抗體 人源化抗體 噬菌體展示

圖片來源：視覺中國

【延伸閱讀】

單克隆抗體自1975年問世以來，在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)、腫瘤的導(dǎo)向治療和放射免疫顯像技術(shù)等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用，但利用鼠源淋巴細(xì)胞雜交瘤制備的單克隆抗體用于人體，很容易被人類的免疫系統(tǒng)識別，不但產(chǎn)生人抗鼠抗體，使得抗體療效減弱，還可能引起過敏反應(yīng)?；蚬こ炭贵w是在深入了解抗體基因結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)上，根據(jù)研究者的目的，利用DNA（脫氧核糖核酸）重組技術(shù)，在基因水平設(shè)計(jì)生產(chǎn)出新型的抗體。其中全人源抗體具有高親和力、高特異性以及毒副作用小的優(yōu)點(diǎn)，在全球單抗市場中所占的比重越來越大。

通過重組抗體文庫突變與篩選獲得全人化抗體過程如下：首先是通過克隆多樣化連接的抗體基因，構(gòu)建抗體基因文庫。然后，應(yīng)用不同的展示技術(shù)，表達(dá)抗體基因，將抗體的基因型和表型偶聯(lián)。接下來是通過抗原作用，施加選擇壓力，挑選合適的抗體。最后，擴(kuò)增篩選出來的抗體，將獲得的抗體基因進(jìn)行突變處理，用于新一輪的篩選，如此循環(huán)，直至獲得滿意的抗體。

目前抗體文庫篩選技術(shù)包括噬菌體展示、核糖體和信使核糖核酸展示、微生物細(xì)胞展示、逆轉(zhuǎn)錄病毒展示、慢病毒展示、淋巴細(xì)胞展示和體外區(qū)域化的微珠展示等。噬菌體展示是將抗體片段的編碼基因融合噬菌體的一個胞膜蛋白基因克隆進(jìn)入噬菌體載體中，使抗體片段展示于噬菌體表面的技術(shù)，是用于抗體文庫展示和篩選使用最廣泛的方法。目前，以上展示技術(shù)還不能廣泛地應(yīng)用于完整免疫球蛋白G抗體的展示，需要首先片段化展示后重建完整抗體分子。一輪文庫抗體展示篩選往往會因?yàn)榉翘禺愋缘慕Y(jié)合或親和力低下等原因，不能得到適合于診斷或治療的滿意分子。為了得到高親和力的人源化抗體分子，需要進(jìn)行位點(diǎn)突變和篩選，從而改善抗體的結(jié)合特性。

高質(zhì)量的抗體文庫，是篩選出高親和力、高特異性抗體的保證，庫容和多樣性是衡量抗體庫優(yōu)劣的重要指標(biāo)，特別是天然抗體庫，理論上庫容越大，多樣性越高，越容易篩選到高親和力的抗體。

（延伸閱讀作者：東北師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 宋成程博士）

責(zé)任編輯：張兆都