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馮 毛，李建科
（中國農(nóng)業(yè)科學院蜜蜂研究所）
摘要：蜂王漿是我國的第二大宗蜂產(chǎn)品，對我國蜂業(yè)和人類健康事業(yè)發(fā)揮重要作用。蜂王漿生產(chǎn)遍采用的方式是移蟲后68~72h取漿，然而移蟲后24h和48h與72h所取蜂王漿的成分和功能是否存在差異尚需進行深入研究。通過對24h、48h和70h所生產(chǎn)的蜂王漿的成分，抑菌能力，蛋白質(zhì)組和N-糖基化蛋白質(zhì)組的分析，以及對蜂王漿主蛋白1 (MRJP1)和2 (MRJP2)的抗高血壓功效和抑制幼蟲芽孢桿菌(Paenibacillus larvae)能力的比較研究，探究取漿時間對蜂王漿理化特征及功能的影響。移蟲后3個時間點所取蜂王漿的水分、粗蛋白、酸度和10-HDA含量均能達到蜂王漿優(yōu)等品的國標標準，雖然水分含量隨取漿時間間隔的延長而顯著升高，粗蛋白、酸度和10-HDA的含量均顯著降低，但干物質(zhì)不同取漿時間差異不顯著。蜂王漿水溶液及蜂王漿水溶性蛋白質(zhì)對枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大腸桿菌(Escherichia coli)均具有顯著抑制作用，但不同取漿時間蜂王漿抑菌效果無顯著差異。3個時間點的蜂王漿中分別鑒定131、136和138個蛋白質(zhì)，共有蛋白有104個，其中新鑒定蛋白質(zhì)58個。3個時間點蜂王漿分別鑒定44、80和83個糖蛋白，各自攜帶96個、188和197個N-糖基化位點；其中24h蜂王漿只有N-X-V一個特征motif，而48h和70h蜂王漿的特征motif均有3個，N-X-V，N-X-T和N-X-S(X≠P)，說明取漿時間能著影響蜂王漿N-糖基化蛋白數(shù)量、N-糖基化位點數(shù)、N-糖肽的特征motif，但70h蜂王漿均多于其它2個時間點。3個時間點蜂王漿糖基化修飾的MRJP1均能顯著抑制小鼠平滑肌細胞的增殖、遷移和收縮，說明取漿時間對MRJP1抗高血壓功能無顯著影響。同時不同取漿時間的糖基化修飾MRJP2均能顯著抑制幼蟲芽孢桿菌的生長，表明取漿時間對MRJP2抑菌功能無顯著影響。糖基化MRJP2通過降低幼蟲芽孢桿菌菌體的疏水性、對營養(yǎng)物質(zhì)吸附能力、增加膜的通透性；同時芽孢細胞壁形成的蛋白質(zhì)和能量生成受阻，從而實現(xiàn)抑菌。研究結(jié)果表明移蟲后不同取漿時間對蜂王漿的成分、抑菌和抗高血壓能力無顯著影響、糖基化修飾對蜂王漿蛋白功能具有重要影響，這為蜂王漿生產(chǎn)、功能成分進一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。
關(guān)鍵詞：蜂王漿；取漿時間；N-糖基化修飾；抗高血壓；抑菌機理
